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細胞爬片的操作方法以及技巧!

更新時間:2022-10-13    點擊次數:1888

  細胞爬片的操作方法以及技巧!


  在醫學生物研究中,免疫熒光檢測等需用到細胞爬片。現有的細胞爬片多采用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在做免疫熒光檢測時,為了節約抗體,需免疫組化筆在爬片上進行范圍的圈定,將抗體加入劃定區域,免疫組化筆中的疏水成分阻滯抗體溢出所圈定的范圍,從而達到節約抗體的目的。細胞爬片是細胞培養中比較經常會用到的,現將自己操作的一些方法與技巧拿與大家分享。

  細胞爬片的特點:

  1.玻片表面經過TC處理,雙面均可使用。

  2.γ射線滅菌,保證無菌。

  3.使用便捷,只需打開包裝,將爬片放入孔板內,將細胞懸液滴到爬片上即可培養。

  4.爬片厚度為0.17mm,直徑為8mm/14mm/20mm/25mm.分別適用于48孔細胞培養板/24孔細胞培養板/12孔細胞培養板/6孔細胞培養板。

  5.吸附:該玻片表面具有陽離子電荷,可以通過靜電作用吸附冰凍切片組織或細胞,使之粘附在玻片上,進而在玻璃和切片組織之間形成共價鍵.因此,無需粘黏劑或者蛋白包被,該玻片也能牢固的粘附切片或細胞。

  爬片的準備:

  1、爬片可用一般的蓋玻片,也可用專用爬片;

  2、應用蓋玻片,可根據自己的需要剪裁成合適的大小,以備置于6孔板、12孔板或24孔板;

  3、將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再用三蒸水沖洗3遍(個人認為主要目的是沖洗干凈就可以了),放在飯盒或者培養皿(一定是玻璃的哦,要不然就……)中烘干后進行高壓消毒。

  培養板的準備:

  1、泡酸過夜

  2、沖洗,烘干(1、2步驟與前大致相同)

  3、放入超凈工作臺用紫外線照1~2小時就可以用了(在照之前可以將爬片一并放入,若細胞貼壁能力不強,可經多聚賴氨酸浸片后放入。貼壁能力強的話,就可以省略了,進行紫外線消毒)

  注:此步自己的經驗是爬片可以先浸入消毒后的PBS內,緊接著放入培養板內。目的:浸過PBS的爬片依靠表面的液體,可以用培養板孔底貼和緊密,以利于細胞長到爬片上。(自己剛開始做的時候,經常就是細胞全都長在了爬片與培養板之間,爬片上細胞罕見。)

  細胞爬片:

  1、胰酶消化細胞后計數

  2、根據自己的需要選擇合適的細胞密度種入培養板內即可

  3、第二天即可進行干預措施

  細胞爬片的操作方法以及技巧!先和大家介紹到這,如果想要了解更多細胞爬片的信息,可以關注天津本生,本生生物醫藥客戶提供生物實驗室檢測試劑及耗材,歡迎廣大客戶來詢。


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